Khowe, Beninas dienvidos, tika veikta virkne uz būdām balstītu izmēģinājuma izmēģinājumu, lai novērtētu jaunu un uz lauka pārbaudītu nākamās paaudzes moskītu tīklu bioloģisko efektivitāti pret piretrīnam rezistentiem malārijas vektoriem. Lauka vecuma tīkli no mājsaimniecībām tika izņemti pēc 12, 24 un 36 mēnešiem. Tīmekļa gabali, kas izgriezti no veseliem ITN, tika analizēti, lai noteiktu ķīmisko sastāvu, un katra izmēģinājuma laikā tika veikti jutības biotesti, lai novērtētu izmaiņas insekticīdu rezistencē Khowe vektoru populācijā.
Interceptor® G2 pārspēja citus ITN, apstiprinot piretroīda un hlorfenapira tīklu pārākumu pār citiem tīklu veidiem. Starp jaunajiem produktiem visi nākamās paaudzes ITN uzrādīja labāku bioefektivitāti nekā Interceptor®; tomēr šī uzlabojuma apjoms pēc lauka novecošanas tika samazināts nepiretroīdu savienojumu īsākas noturības dēļ. Šie rezultāti uzsver nepieciešamību uzlabot nākamās paaudzes ITN insekticīdu noturību.
Insekticīds- apstrādātiem moskītu tīkliem (ITN) pēdējo 20 gadu laikā ir bijusi izšķiroša nozīme malārijas saslimstības un mirstības samazināšanā. Kopš 2004. gada visā pasaulē ir izplatīti vairāk nekā 3 miljardi ITN, un modelēšanas pētījumi liecina, ka no 2000. līdz 2015. gadam 68 % malārijas gadījumu Subsahāras Āfrikā tika novērsti. Diemžēl malārijas pārnēsātāju populāciju rezistence pret piretroīdiem (standarta insekticīdu klase, ko izmanto ITN) ir ievērojami palielinājusies, apdraudot šīs būtiskās iejaukšanās efektivitāti. Tajā pašā laikā malārijas kontroles progress visā pasaulē ir palēninājies, un kopš 2015. gada vairākās valstīs ar lielu slogu ir pieaudzis malārijas gadījumu skaits. Šīs tendences ir veicinājušas jaunas paaudzes inovatīvu ITN produktu izstrādi, kuru mērķis ir novērst piretroīdu rezistences draudus un palīdzēt samazināt šo slogu un sasniegt vērienīgus globālus mērķus.
Pašlaik tirgū ir trīs jaunas paaudzes ITN, un katrs no tiem apvieno piretroīdu ar citu insekticīdu vai sinerģistu, kas spēj pārvarēt piretroīdu rezistenci malārijas vektoros. Pēdējos gados ir veikti vairāki klasteru randomizēti kontrolēti pētījumi (RCT), lai novērtētu šo tīklu epidemioloģisko efektivitāti salīdzinājumā ar standarta tīkliem, kas satur tikai piretroīdus, un sniegtu nepieciešamos pierādījumus, lai atbalstītu Pasaules Veselības organizācijas (PVO) ieteikumus. Gultas tīkliņi, kuros piretroīdi ir apvienoti ar piperonilbutoksīdu (PBO), sinerģists, kas paaugstina piretroīdu efektivitāti, inhibējot moskītu detoksikācijas enzīmus, bija pirmie, ko PVO ieteica pēc tam, kad divi produkti (Olyset® Plus un PermaNet® 3.0) uzrādīja labāku epidemioloģisko ietekmi, salīdzinot ar trijunāli kontrolētu piretroīdu tīklu un nejauši kontrolētu piretroīdu tīklu. Uganda. Tomēr ir vajadzīgi vairāk datu, lai noteiktu piretroīdu-PBO gultu tīklu sabiedrības veselības vērtību Rietumāfrikā, kur nopietna piretroīdu rezistence var samazināt to priekšrocības salīdzinājumā ar tikai piretroīdu gultu tīkliem.
ITN insekticīdu noturību parasti novērtē, periodiski savācot tīklus no kopienām un pārbaudot tos laboratorijas biopārbaudēs, izmantojot kukaiņu audzētus moskītu celmus . Lai gan šie testi ir noderīgi, lai raksturotu insekticīdu bioloģisko pieejamību un efektivitāti uz gultas tīklu virsmas laika gaitā, tie sniedz ierobežotu informāciju par dažādu nākamās paaudzes gultu tīklu veidu salīdzinošo efektivitāti, jo izmantotajām metodēm un moskītu celmiem ir jābūt pielāgotiem tajos esošo insekticīdu darbības veidam. Eksperimentālais būdiņas tests ir alternatīva pieeja, ko var izmantot, lai salīdzinoši novērtētu ar insekticīdiem apstrādātu tīklu efektivitāti izturības pētījumos apstākļos, kas imitē dabisko mijiedarbību starp savvaļas moskītu saimniekiem un mājsaimniecības tīkliem lietošanas laikā. Patiešām, nesenie modelēšanas pētījumi, kuros epidemioloģiskiem datiem izmanto entomoloģiskos surogātus, ir parādījuši, ka šajos pētījumos izmērīto moskītu mirstību un barošanās rādītājus var izmantot, lai prognozētu ITN ietekmi uz malārijas sastopamību un izplatību klasteru RCT. Tādējādi uz būdām balstīti eksperimentālie pētījumi, kuros uz lauka savākti ar insekticīdiem apstrādāti limfmezgli ir iekļauti klasteru RCT, var sniegt vērtīgus datus par salīdzinošo ar insekticīdiem apstrādāto limfmezglu bioefektivitāti un insekticīdu noturību to paredzamā mūža garumā, kā arī palīdzēt interpretēt šo pētījumu epidemioloģiskos rezultātus.
Eksperimentālais būdiņas tests ir standartizēta simulēta cilvēku mājvieta, ko Pasaules Veselības organizācija ieteikusi ar insekticīdiem apstrādātu moskītu tīklu efektivitātes novērtēšanai. Šie testi atkārto reālās ekspozīcijas apstākļus, ar kuriem saskaras odu saimnieki, mijiedarbojoties ar mājsaimniecības gultu tīkliem, un tāpēc tie ir ļoti piemērota pieeja, lai novērtētu izmantoto gultu tīklu bioloģisko efektivitāti to paredzamā kalpošanas laikā.
Šajā pētījumā tika novērtēta trīs dažādu veidu jaunās paaudzes insekticīdu moskītu tīklu (PermaNet® 3.0, Royal Guard® un Interceptor® G2) entomoloģiskā efektivitāte lauka apstākļos eksperimentālos šķūņos un salīdzināta ar standarta tīklu, kas satur tikai piretrīnu (Interceptor®). Visi šie ar insekticīdiem apstrādātie moskītu tīkli ir iekļauti PVO iepriekš kvalificētajā sarakstā pārnēsātāju kontrolei. Tālāk ir sniegti detalizēti katra moskītu tīkla raksturlielumi:
2020. gada martā būdiņu ciematos Zou prefektūrā Beninas dienvidos tika veikta liela mēroga uz lauka novecotu moskītu tīklu izplatīšanas kampaņa izmēģinājuma izmēģinājumiem būdās. Interceptor®, Royal Guard® un Interceptor® G2 gultu tīkli tika atlasīti no nejauši izvēlētām kopām Koves, Zagnanado un Ouinhi pašvaldībās kā daļa no izturības novērošanas pētījuma, kas tika ievietots klastera RCT, lai novērtētu ar dubultu insekticīdiem apstrādātu gultu tīklu epidemioloģisko efektivitāti. PermaNet® 3.0 moskītu tīkli tika savākti Avokanzun ciematā netālu no Jija un Bohicon ciematiem (7°20′ N, 1°56′ E) un tika izplatīti vienlaikus ar RCT kopu moskītu tīkliem Nacionālās malārijas kontroles programmas 2020. gada masu kampaņas laikā. 1. attēlā parādītas to pētījumu kopu/ciematu atrašanās vietas, kurās tika savākti dažādi ITN veidi attiecībā pret eksperimentālajām būdām.
Tika veikts izmēģinājuma tipa izmēģinājums, lai salīdzinātu Interceptor®, PermaNet® 3.0, Royal Guard® un Interceptor® G2 ITN entomoloģisko veiktspēju, kad tie tika izņemti no mājsaimniecībām 12, 24 un 36 mēnešus pēc izplatīšanas. Katrā gada laika posmā novecojušo ITN veiktspēja uz lauka tika salīdzināta ar jauniem, neizmantotiem katra veida tīkliem un neapstrādātiem tīkliem kā negatīvu kontroli. Katrā ikgadējā laika posmā kopā tika pārbaudīti 54 atkārtoti lauka veco ITN paraugi un 6 jauni katra veida ITN 1 vai 2 atkārtotos būdiņu izmēģinājumos ar ikdienas apstrādes rotāciju. Pirms katra būdiņas izmēģinājuma tika izmērīts katra ITN tipa veco lauka tīklu vidējais porainības indekss saskaņā ar PVO ieteikumiem. Lai modelētu nolietojumu no ikdienas lietošanas, visi jaunie ITN un neapstrādātie kontroles tīkli tika perforēti ar sešiem 4 x 4 cm caurumiem: pa diviem katrā garajā sānu panelī un pa vienam katrā īsajā sānu panelī saskaņā ar PVO ieteikumiem. Moskītu tīkls tika uzstādīts būdas iekšpusē, jumta lokšņu malas piesienot ar virvēm pie naglām būdas sienu augšējos stūros. Katrā būdiņas izmēģinājumā tika novērtētas šādas ārstēšanas metodes:
Laukā vecie tīkli tika novērtēti eksperimentālajās būdās tajā pašā gadā, kad tīkli tika izņemti. Būdas izmēģinājumi tika veikti tajā pašā vietā no 2021. gada maija līdz septembrim, 2022. gada aprīļa līdz jūnijam un 2023. gada maija līdz jūlijam, un tīkli tika izņemti attiecīgi pēc 12, 24 un 36 mēnešiem. Katrs izmēģinājums ilga vienu pilnu ārstēšanas ciklu (54 naktis 9 nedēļu laikā), izņemot 12 mēnešus, kad tika veikti divi secīgi ārstēšanas cikli, lai palielinātu moskītu parauga lielumu. Pēc latīņu kvadrāta dizaina ārstēšanas metodes tika mainītas katru nedēļu starp eksperimentālajām būdām, lai kontrolētu būdiņas atrašanās vietas ietekmi, savukārt brīvprātīgie tika mainīti katru dienu, lai kontrolētu atšķirības atsevišķu saimnieku moskītu pievilcībā. Odi tika vākti 6 dienas nedēļā; 7. dienā, pirms nākamā rotācijas cikla, būdas tika iztīrītas un vēdinātas, lai novērstu invāziju.
Primārie efektivitātes beigu punkti eksperimentālajai būdiņu apstrādei pret piretroīdiem rezistentiem Anopheles gambiae odiem un nākamās paaudzes ITN salīdzināšanai ar tikai piretroīdiem paredzētu Interceptor® tīklu:
Sekundārie efektivitātes beigu punkti eksperimentālajai būdiņu apstrādei pret piretroīdiem rezistentiem Anopheles gambiae odiem bija šādi:
Ierobežojums (%) – samazināts iekļūšanas rādītājs ārstētajā grupā salīdzinājumā ar neapstrādāto grupu. Aprēķins ir šāds:
kur Tu ir neapstrādātajā kontroles grupā iekļauto odu skaits, un Tt ir apstrādātajā grupā iekļauto odu skaits.
Atbrīvošanās koeficients (%) – izdalīšanās ātrums iespējamā ārstēšanas izraisītā kairinājuma dēļ, kas izteikts kā uz balkona savākto odu īpatsvars.
. Asinssūcēju nomākšanas koeficients (%) ir asinssūcēju odu īpatsvara samazināšanās ārstētajā grupā, salīdzinot ar neārstēto kontroles grupu. Aprēķina metode ir šāda: kur Bfu ir asinssūcēju odu īpatsvars neārstētajā kontroles grupā, un Bft ir asinssūcēju odu īpatsvars ārstētajā grupā.
Auglības samazināšanās (%) — auglīgo odu īpatsvara samazināšanās ārstētajā grupā, salīdzinot ar neapstrādāto kontroli. Aprēķina metode ir šāda: kur Fu ir auglīgo odu īpatsvars neapstrādātajā kontroles grupā un Ft ir auglīgo odu īpatsvars apstrādātajā grupā.
Lai uzraudzītu Covè vektoru populāciju rezistences profila izmaiņas laika gaitā, PVO veica in vitro un flakonu bioloģiskos testus tajā pašā gadā, kad tika veikts eksperimentālais izmēģinājums (2021, 2022, 2023), lai novērtētu jutīgumu pret AI pētāmajos ITN un sniegtu informāciju par rezultātu interpretāciju. In vitro pētījumos odi tika pakļauti filtrpapīriem, kas apstrādāti ar noteiktas koncentrācijas alfa-cipermetrīnu (0,05%) un deltametriīnu (0,05%), un pudelēm, kas pārklātas ar noteiktas koncentrācijas CFP (100 μg/pudelē) un PPF (100 μg/pudelē), lai novērtētu jutību pret šiem līdzekļiem. Piretroīdu rezistences intensitāte tika pētīta, pakļaujot odus 5 reizes (0, 25%) un 10 reizes (0, 50%) atšķirīgām α-cipermetrīna un deltametrina koncentrācijām. Visbeidzot, PBO sinerģijas un citohroma P450 monooksigenāzes (P450) pārmērīgas ekspresijas ietekme uz piretroīdu rezistenci tika novērtēta, iepriekš pakļaujot odus atšķirīgai α-cipermetrīna (0,05%) un deltametrina (0,05%) koncentrācijai, un iepriekš pakļaujot PBO (4%). PVO caurules testam izmantotais filtrpapīrs tika iegādāts no Universiti Sains Malaysia. PVO biotestu testa flakoni, izmantojot CFP un PPF, tika sagatavoti saskaņā ar PVO ieteikumiem.
Biotestiem izmantotie odi tika savākti kāpuru stadijā no vairošanās vietām netālu no eksperimentālajām būdām un pēc tam audzēti pieaugušajiem. Katrā laika posmā vismaz 100 odi tika pakļauti katrai apstrādei 60 minūtes ar 4 atkārtojumiem katrā mēģenē/pudelē un aptuveni 25 odi katrā mēģenē/pudelē. Piretroīdu un CFP iedarbībai tika izmantoti 3–5 dienas veci nebaroti odi, savukārt PPF gadījumā tika izmantoti 5–7 dienas veci asinssūcēji odi, lai stimulētu oģenēzi un novērtētu PPF ietekmi uz odu vairošanos. Paralēlā ekspozīcija tika veikta, izmantojot ar silikona eļļu piesūcinātu filtrpapīru, tīru PBO (4%) un ar acetonu pārklātas pudeles kā kontroli. Ekspozīcijas beigās odi tika pārvietoti uz neapstrādātiem traukiem un pakļauti vatei, kas samērcēta 10% (w/v) glikozes šķīdumā. Mirstība tika reģistrēta 24 stundas pēc piretroīdu iedarbības un ik pēc 24 stundām 72 stundas pēc CFP un PPF iedarbības. Lai novērtētu uzņēmību pret PPF, pēc aizkavētas mirstības reģistrēšanas tika izdalīti izdzīvojušie PPF pakļautie odi un atbilstošās negatīvās kontroles, olnīcu attīstība tika novērota, izmantojot salikto mikroskopu, un auglība tika novērtēta atbilstoši Kristofera olšūnu attīstības stadijai [28, 30]. Ja olas bija pilnībā attīstījušās līdz Kristofera V stadijai, odi tika klasificēti kā auglīgi, un, ja olas nebija pilnībā attīstījušās un palika I–IV stadijā, odi tika klasificēti kā sterili.
Katrā gada laikā no jauniem un uz lauka veciem tīkliem tika izgriezti 30 × 30 cm gabali PVO ieteikumos norādītajās vietās [22]. Pēc griešanas tīkli tika marķēti, iesaiņoti alumīnija folijā un uzglabāti ledusskapī 4 ± 2 ° C temperatūrā, lai novērstu AI migrāciju audumā. Pēc tam tīkli tika nosūtīti uz Valonijas lauksaimniecības pētījumu centru Beļģijā ķīmiskai analīzei, lai noteiktu kopējā AI satura izmaiņas to kalpošanas laikā. Izmantotās analītiskās metodes (pamatojoties uz Starptautiskās pesticīdu analīzes kooperatīvās komitejas ieteiktajām metodēm) ir aprakstītas iepriekš [25, 31].
Eksperimentālajiem būdiņu izmēģinājuma datiem kopējais dzīvu/mirušo, kodīgo/nekožojošo un auglīgo/sterilu odu skaits dažādos būdiņu nodalījumos tika summēts katrai apstrādei katrā izmēģinājumā, lai aprēķinātu dažādus proporcionālos rezultātus (72 stundu mirstība, sakodiens, ektoparazītisms, to atbilstošā 9. auglības 5% CI). Šo proporcionālo bināro rezultātu ārstēšanas atšķirības tika analizētas, izmantojot loģistisko regresiju, savukārt atšķirības skaitīšanas iznākumos tika analizētas, izmantojot negatīvu binomiālo regresiju. Tā kā ik pēc 12 mēnešiem tika veikti divi apstrādes rotācijas cikli un dažas ārstēšanas metodes tika pārbaudītas visos pētījumos, moskītu iespiešanās analīzes tika pielāgotas katras ārstēšanas dienu skaitam. Tika analizēts arī jaunais ITN katram rezultātam, lai iegūtu vienu novērtējumu visiem laika punktiem. Papildus galvenajam ārstēšanas skaidrojošajam mainīgajam katrā modelī bija iekļauta būda, gulšņi, izmēģinājuma periods, ITN diafragmas indekss un diena kā fiksēti efekti, lai kontrolētu atšķirības, kas radušās atsevišķu gulšņu un būdas pievilcības, sezonalitātes, moskītu tīkla statusa un pārmērīgas izkliedes atšķirības dēļ. Regresijas analīzes radīja koriģētas izredžu attiecības (OR) un atbilstošus 95% ticamības intervālus, lai novērtētu jaunās paaudzes ITN ietekmi, salīdzinot ar tikai piretroīdu tīklu Interceptor®, uz primārajiem moskītu mirstības un auglības rezultātiem. P vērtības no modeļiem tika izmantotas arī, lai piešķirtu kompaktus burtus, kas norāda statistisko nozīmīgumu 5% līmenī visiem primāro un sekundāro rezultātu salīdzinājumiem pa pāriem. Visas regresijas analīzes tika veiktas Stata versijā 18.
Covese vektoru populāciju jutība tika interpretēta, pamatojoties uz mirstību un auglību, kas novērota in vitro un pudelēs veiktos biopārbaudēs saskaņā ar Pasaules Veselības organizācijas ieteikumiem. Ķīmiskās analīzes rezultāti nodrošināja kopējo AI saturu ITN fragmentos, kas tika izmantots, lai aprēķinātu mākslīgā intelekta aiztures līmeni lauka vecumos, salīdzinot ar jauniem tīkliem katrā laika punktā katru gadu. Visi dati tika manuāli ierakstīti standartizētās veidlapās un pēc tam divreiz ievadīti Microsoft Excel datu bāzē.
Beninas Veselības ministrijas (Nr. 6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA), Londonas Higiēnas un tropiskās medicīnas skolas (LSHTM) (Nr. 16237) un Pasaules Veselības organizācijas (Nr. ERC.0003153) ētikas komitejas apstiprināja izmēģinājuma būdiņas veikšanu, iesaistot brīvprātīgos. Pirms dalības pētījumā no visiem brīvprātīgajiem tika iegūta rakstiska informēta piekrišana. Visi brīvprātīgie saņēma bezmaksas ķīmijprofilaksi, lai samazinātu malārijas risku, un visu izmēģinājuma laiku dežurēja medmāsa, lai novērtētu ikvienu brīvprātīgo, kuram parādījās drudža simptomi vai nevēlama reakcija uz testa produktu.
Pilni rezultāti no eksperimentālajām būdām, apkopojot kopējo dzīvo / mirušo, izsalkušo / ar asinīm baroto un auglīgo / sterilo odu skaitu katrā eksperimentālajā grupā, kā arī aprakstošā statistika ir sniegti kā papildu materiāls (S1 tabula).
Eksperimentālā būdā Kovā, Beninā, tika nomākta pret piretroīdiem izturīgu savvaļas Anopheles gambiae odu barošanās ar asinīm. Dati no neapstrādātām kontrolēm un jauniem tīkliem tika apkopoti pētījumos, lai nodrošinātu vienu efektivitātes novērtējumu. Veicot loģistiskās regresijas analīzi, kolonnas ar parastiem burtiem būtiski neatšķīrās 5% līmenī (p > 0,05). Kļūdu joslas atspoguļo 95% ticamības intervālus.
Pret piretroīdiem izturīgu savvaļas Anopheles gambiae odu mirstība, kas nonāk eksperimentālā būdā Kovā, Beninā. Dati no neapstrādātām kontrolēm un jauniem tīkliem tika apkopoti visos pētījumos, lai nodrošinātu vienotu efektivitātes novērtējumu. Veicot loģistiskās regresijas analīzi, kolonnas ar parastiem burtiem būtiski neatšķīrās 5% līmenī (p > 0,05). Kļūdu joslas atspoguļo 95% ticamības intervālus.
Izredzes koeficients raksturo mirstības atšķirību ar jaunās paaudzes moskītu tīkliem salīdzinājumā ar moskītu tīkliem, kas paredzēti tikai piretroīdiem. Punktētā līnija apzīmē izredžu attiecību 1, kas norāda uz mirstības atšķirību neesamību. Izredzes koeficients > 1 norāda uz lielāku mirstību ar jaunās paaudzes moskītu tīkliem. Dati par jaunās paaudzes moskītu tīkliem tika apkopoti vairākos izmēģinājumos, lai iegūtu vienu efektivitātes novērtējumu. Kļūdu joslas atspoguļo 95% ticamības intervālus.
Lai gan Interceptor® uzrādīja viszemāko mirstību no visiem pārbaudītajiem ITN, lauka novecošana negatīvi neietekmēja tā ietekmi uz pārnēsātāju mirstību. Faktiski jaunais Interceptor® izraisīja 12% mirstību, savukārt laukā veciem tīkliem bija neliels uzlabojums 12 mēnešos (17%, p = 0,006) un 24 mēnešos (17%, p = 0,004), bet pēc 36 mēnešiem atgriezās līdz līmenim, kas līdzīgs jauniem tīkliem (11%, p = 0,05). Turpretim mirstības rādītāji nākamās paaudzes tīkliem, kas apstrādāti ar insekticīdiem, laika gaitā pēc izvietošanas pakāpeniski samazinājās. Samazinājums visizteiktākais bija ar Interceptor® G2, kur mirstība samazinājās no 58% ar jaunajām acīm līdz 36% pēc 12 mēnešiem (p< 0,001), 31% pēc 24 mēnešiem (lpp< 0,001) un 20% 36 mēnešos (lpp< 0,001). Jaunā PermaNet® 3.0 rezultātā mirstība samazinājās līdz 37%, kas arī ievērojami samazinājās līdz 20% pēc 12 mēnešiem (p< 0,001), 16% 24 mēnešos (lpp< 0,001) un 18% pēc 36 mēnešiem (lpp< 0,001). Līdzīga tendence tika novērota ar Royal Guard®, ar jauno sietu par 33% samazināja mirstību, kam sekoja ievērojams samazinājums līdz 21% pēc 12 mēnešiem (p< 0,001), 17% 24 mēnešos (lpp< 0,001) un 15% pēc 36 mēnešiem (lpp< 0,001).
Pret piretroīdiem izturīgu savvaļas Anopheles gambiae odu auglības samazināšanās, kas nonāk eksperimentālā būdā Kvā, Beninā. Dati no neapstrādātām kontrolēm un jauniem tīkliem tika apkopoti visos pētījumos, lai nodrošinātu vienotu efektivitātes novērtējumu. Loģistikas regresijas analīzē joslas ar parastiem burtiem būtiski neatšķīrās 5% līmenī (p > 0,05). Kļūdu joslas atspoguļo 95% ticamības intervālus.
Izredzes koeficienti apraksta atšķirību auglībā, izmantojot jaunās paaudzes moskītu tīklus, salīdzinot ar moskītu tīkliem, kas paredzēti tikai piretroīdiem. Punktētā līnija apzīmē attiecību 1, kas nenorāda uz auglības atšķirībām. Likmes koeficienti< 1 norāda uz lielāku auglības samazināšanos ar jaunās paaudzes tīkliem. Dati par jaunās paaudzes moskītu tīkliem tika apkopoti vairākos izmēģinājumos, lai iegūtu vienu efektivitātes novērtējumu. Kļūdu joslas atspoguļo 95% ticamības intervālus.
Izlikšanas laiks: 17. februāris 2025