Izstrādāt uzticamas un standartizētas metodes odu baru uzņēmības pret insekticīdiem pārbaudei ir ļoti svarīgi, lai izprastu jaunu aktīvo vielu vai formulu efektivitāti. Metodes odu baru uzņēmības pret kontakta insekticīdiem vai produktiem (piemēram, tiem, kas tiek reklamēti sabiedrības veselības programmās) pārbaudei ir labi izveidotas un standartizētas. Tomēr mājsaimniecības produktos izmantoto gaistošo vai aerosolu insekticīdu testēšanas metodes ir grūti efektīvi ieviest. Pamatojoties uz Pasaules Veselības organizācijas ieteikumiem par mājsaimniecības insekticīdiem, mēs izstrādājām standartizētu un augstas caurlaidības metodi aerosolu produktu testēšanai, izmantojot sprostos ievietotus odus, un efektīvu dezinfekcijas metodi, kas tika veikta Peet-Grady testa kamerā (PG testa kamera). Mēs validējām šīs jaunās metodes efektivitāti, izmantojot pret insekticīdiem izturīgu un jutīgu Aedes un Anopheles odu populācijas. Šīs metodes jauna iezīme ir kameras iekļaušana, kas vērsta pret odu būriem, ļaujot reāllaikā kvantitatīvi novērtēt odu nogalināšanas rādītājus pēc insekticīdu iedarbības. Dezinfekcijas tamponi efektīvi noņem atlikušo piretroīdu saturošo aerosola eļļu no testa kameras virsmas, un jutīgo odu, kas testēti tieši uz kameras virsmas, mirstības rādītājs ir mazāks par 2%. PG kamerā netika novērota telpiskā neviendabība sprostos ievietoto odu nogalināšanas vai mirstības rādītājos. Mūsu divu būru metode nodrošina astoņas reizes lielāku caurlaidspēju nekā brīvās lidojuma metode, ļaujot vienlaikus testēt dažādas odu celmus un efektīvi atšķirt paralēli testētās uzņēmīgās un rezistentās odu populācijas.
Līdz šim aerosolu insekticīdi galvenokārt ir izmantoti mājās personīgajai aizsardzībai, un sabiedrības veselības programmās tie ir izmantoti ierobežoti. Tomēr jaunākie pētījumi liecina par plašu insekticīdu lietošanu mājsaimniecībās apgabalos, kur izplatītas vektoru pārnēsātas slimības. Neatkarīgi no tā, vai motivācija ir odu atbaidīšana vai slimību profilakse, ir steidzami nepieciešamas standartizētas un viegli lietojamas metodes endēmisko odu populāciju skrīningam, lai noteiktu to uzņēmību pret mājsaimniecības insekticīdiem. Tas ir ļoti svarīgi, lai prognozētu insekticīdu efektivitāti pret vietējiem vektoriem un izprastu, kā mājsaimniecības insekticīdu lietošana ietekmē evolūcijas atlasi insekticīdu rezistencei.
1. papildmetode sniedz detalizētus soli pa solim sniegtus norādījumus mūsu aerosola insekticīdu testēšanas programmas veikšanai.
Lai gan PVO vadlīnijas iesaka lietot automatizētus smidzinātājus, tās nesniedz konkrētas tehniskās specifikācijas. Automatizētu smidzinātāju lietošana ir ļoti svarīga, jo manuāla izsmidzināšana propilēnglikola kamerā ir ne tikai darbietilpīga, bet var izraisīt arī telpiskas neatbilstības un variācijas izsmidzināšanas ilgumā.
Reakcijas kamera ir jāsterilizē pēc katra testa, taču PVO vadlīnijās ieteiktā iekšējās tīrīšanas metode ietver ūdens izmantošanu no šļūtenes. Mūsu ikdienas darbā šī metode ir darbietilpīgākais solis bioanalītisko iekārtu lietošanā, tāpēc mēs izstrādājām un testējām sterilizācijas procedūru, kuras pamatā ir uztriepes paraugi.
Ventilatora noņemamās daļas apstrādā, kā aprakstīts iepriekš, un ventilatora lāpstiņas un rāmis tiek tīrīti ar sūkli, kas samērcēts 5% Decon 90 šķīdumā.
Pamatojoties uz izsmidzināšanas ilguma un produkta piegādes ātruma savstarpējo saistību, mūsu aerosola dozators arī uzrādīja labu precizitāti aerosola devas attiecības kontrolēšanā, vismaz testētajā diapazonā no 1 līdz 4 reizēm. Kā parādīts 3.b attēlā, šī īpašība ir īpaši svarīga jaunu aerosola preparātu devas un atbildes reakcijas raksturošanai vai identifikācijas devas noteikšanai insekticīdu rezistences noteikšanai.
Mēs pierādām, ka mūsu pārskatītais protokols mājsaimniecības aerosolu insekticīdu novērtēšanai, izmantojot tamponu dezinfekciju, dubultos būrus, attālināti vadāmus smidzinātājus un biometrisko ierakstīšanu no darbības kamerām, ir efektīvāka un reālāka alternatīva pašreizējai metodei.PVOieteikumi. Tamponu dezinfekcijas metode, kas prasa tikai 20 minūtes, ievērojami ietaupa laiku salīdzinājumā ar esošo protokolu (kas parasti prasa vienu stundu katrai testa kamerai). Tā arī samazina laiku, ko operatori pavada, uzvelkot pilnus individuālos aizsardzības līdzekļus (piemēram, elpošanas ķiveres un antistatisku darba apģērbu). Turklāt šī metode rada mazāk piesārņota šķidruma un apģērba apstrādei nekā pilnīga testa kameras tīrīšana, tādējādi samazinot telpas, kurā atrodas testa kamera, piesārņojuma iespējamību. Tamponu dezinfekcijas metode ir piemērota arī daļēji pastāvīgu testa telpu dezinfekcijai, kurām nepieciešamaminimālsMēbeļu izvietojums dažādos telpu plānojumos.
Šajā un citos pētījumos viens no galvenajiem jautājumiem ir vidē lietoto insekticīdu iedarbības devu standartizācija dažādos testēšanas protokolos. Kā parādīts 2.b attēlā, neskatoties uz fiksētu izsmidzināšanas ilgumu, izsmidzināšanas tilpums atšķīrās dažādu veidu aerosoliem, kas, iespējams, atspoguļo atšķirības ražošanas procesos (piemēram, iekšējais spiediens, propelenta izmantošana, sprauslas struktūra utt.). Turklāt pašreizējais komerciāli pieejamu tālvadības izsmidzināšanas ierīču trūkums ar nepieciešamo elastību izsmidzināšanas ilguma ziņā ierobežo to izmantošanu devas un atbildes reakcijas attiecību novērtēšanā odu apkarošanā. Manuāla izsmidzināšana caur testa lūkām vai piekļuves lūkām (ja tādas ir pieejamas) var izraisīt iedarbības devu variācijas. Faktiski mūsu rezultāti uzsver nepieciešamību un nozīmi ir šo variāciju avotu samazināšanai. Rezistentām Aedes aegypti populācijām mēs novērojām korelāciju starp aerosola devu un galīgo jutības vai rezistences noteikšanu (3.b attēls). Ideālā gadījumā aerosola devas būtu standartizētas aerosolizētās vielas gramos, nevis aerosolizācijas ilgumā, lai atvieglotu salīdzināšanu starp dažādiem pētījumiem.
RCAD piedāvā alternatīvu pieeju turpmākajiem pētījumiem, kas samazina procesa variāciju ietekmi. Lai gan mēs atklājām, ka aerosolu izsmidzināšanas standartizācija nav iespējama, mēs pierādījām, ka aerosola masu, kas tiek piegādāta caur dažādām aerosola baloniņām, var reproducējami novērtēt, kalibrējot izsmidzināšanas garumu (2.b, 3.a attēls). Šāda aerosola koncentrācijas standartizācija jebkurā testa kamerā ir ļoti svarīga, lai uzlabotu rezultātu reproducējamību.
Balstoties uz mūsu un citu pētniecības grupu pieredzi, pašreizējās vadlīnijās ietvertie ieteikumi par aerosolu noteikšanas metožu izmantošanu brīvi lidojošu odu testēšanai rada ievērojamas loģistikas problēmas laboratorijas un daļēji lauka pētījumiem. Piemēram, brīvi lidojošu odu noteikšanas metodēm ir ļoti zema caurlaidspēja (tostarp darbietilpīga izdzīvojušo brīvi lidojošo odu notveršana), un tām ir vairāki tehniski ierobežojumi, piemēram, grūtības noteikt nogalināšanas rādītājus reāllaikā.
Lai gan mūsu validētais divu būru eksperiments risina plūsmas ierobežojumu problēmu un ir iespējama metode odu uzņēmības pret aerosolu insekticīdiem skrīningam, jāatzīmē, ka Kaimanu salu odu mirstības rādītāji būra eksperimentā bija ievērojami zemāki nekā brīvās lidojuma eksperimentā (5.c attēls, 1. tabula). Šī atšķirība var atspoguļot insekticīda devas samazināšanu būra iekšpusē, jo mazāk aerosola pilienu iekļūst caur sietu un nonāk būrī. Turpmākajos pētījumos varētu izmantot lielāka sieta audumus un būru konstrukcijas ar lielāku ventilatora gaisa plūsmas ātrumu (piemēram, cilindriskas konstrukcijas), lai vēl vairāk apstiprinātu ar dažādām eksperimentālajām metodēm iegūtos rezultātus.
Publicēšanas laiks: 2026. gada 2. februāris